北京安必奇生物科技有限公司具有病毒诱导植物基因沉默(virus-induced gene silencing (VIGS) in plants)平台。VIGS是快速研究植物基因功能的一种较强大的反向遗传学工具,目前已被用于多种单子叶和双子叶植物。
VIGS系统利用携带有靶基因片段的病毒载体产生dsRNA,进而启动RNA介导的基因沉默。简而言之,在病毒载体导入宿主细胞后,植物体会在RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RDRP)和Dicer酶的作用下产生21-25 nt的小干扰RNA (siRNAs),随后siRNA与AGO等蛋白形成RNA诱导的沉默复合物。siRNA的反义链可在转录后水平上诱导靶mRNA的降解或抑制mRNA的翻译。该反义链还可通过RNA介导的DNA甲基化使目标基因的启动子甲基化,抑制它的转录。
与其他基因沉默途径相比,VIGS具有许多优点:
稳定和操作简单:目标基因片段可以通过直接克隆连接到病毒载体中,而不需要像RNAi一样通过反向重复序列进行组装。反向重复序列在细菌繁殖过程中会不稳定。
实验周期短:VIGS载体通过农杆菌或基因枪介导的方法转入植物后,通常1-2周后就可看到表型。
费用低:VIGS的花费低且可以进行高通量的筛选。
VIGS的优点使其已经逐渐替代RNAi用于植物基因沉默。北京安必奇生物已成功开发了多种病毒载体,如烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)、马铃薯X病毒(potato X virus,PVX)、烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus,TRV)、番茄金色花叶病毒(tomato golden mosaic virus,TGMV)、非洲木薯花叶病毒(African cassava mosaic virus,ACMV)、大麦条纹花叶病毒(barley stripe mosaic virus,BSMV)。并且我们可进行多种植物的转基因,如烟草、马铃薯、矮牵牛、棉花、胡椒、大麦、拟南芥、大豆和水稻等,可以满足客户多样的需求。
VIGS服务流程:
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