信使RNA(messenger RNA,mRNA)是以DNA的一条链为模板转录而来的、携带遗传信息的能指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸。在体外,通过将DNA模板、RNA聚合酶和核苷酸三磷酸酯(NTPs)与含镁缓冲液、RNase抑制剂等结合起来,经过体外转录(in vitro transcription,IVT)可以实现体外合成mRNA。体外转录的mRNA有几个优点:它没有基因组整合的风险,其编码的蛋白质在细胞质中表达不需要穿过核膜,而且有自然降解途径,可确保其活性是暂时的。此外,IVT合成的mRNA可以进行设计和序列优化,以提高翻译效率,并且可在IVT过程中加入修饰核苷,如5-甲基胞苷(5-methylcytidine, m5C)和假尿苷(pseudouridine,Ψ),以提高翻译效率,生物稳定性,降低免疫原性。所有这些特点引发了对合成的mRNA在不同领域的探索,如基因编辑、细胞重编程、针对癌症和传染病的免疫疗法以及再生医学等。
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