背景介绍
原核表达系统是较早用于重组蛋白表达的宿主菌,其在蛋白质表达领域被认为是主要的工具。大肠杆菌蛋白表达系统目前也是使用较广泛也比较经济实惠的蛋白表达系统,因其遗传背景清晰;易于培养和控制;转化操作简单;表达水平高;成本低;周期短等特点而适用于大部分蛋白的表达。
安必奇技术团队拥有丰富的大肠杆菌系统蛋白表达经验,我们不仅会根据不同蛋白的特性以及客户的要求,为客户提供有针对性的定制化服务;还有着丰富的经验以应对大肠杆菌蛋白表达过程中可能会遇到的各种问题,例如蛋白可溶性差,形成包涵体以及内毒素含量较高等,因此,安必奇生物会根据项目的具体情况而提供以下可选的附加定制服务:
表达系统优化,降低包涵体形成的几率
优化包涵体复性条件,使包涵体温和复性
切除标签服务
低温诱导表达,提高蛋白可溶性
内毒素去除服务
蛋白质标记服务
服务基本流程
实验流程 | 实验内容 | 交付结果 | 周期 |
密码子优化 | 对客户提供的蛋白序列进行密码子优化,以保证后续的蛋白表达 | 优化序列 | 4-6周 |
基因合成 | 对优化后的密码子进行合成 | 合成序列测序结果 | |
载体构建 | 安必奇生物拥有多种原核表达载体:pET系列(pET28a、pET30a、pET-24等)、pGEX系列、pETBlue、pCold等。 | 载体图谱 | |
蛋白小试表达检测 | 通过选择适合的编导菌株,对蛋白进行小量诱导检测,安必奇生物拥有多种表达菌株:BL21、Origami DE3、Rosetta(DE3)等 | 检测结果 | |
蛋白放大表达纯化 | 安必奇生物拥有AKTA purifier系统和全套预装的离子柱、分子筛、疏水柱及亲和层析柱 | ||
蛋白修饰及内毒素检测 | 安必奇提供多种蛋白的翻译后修饰和检测和蛋白质复性,内毒素去除等服务 | 检测结果 | |
目的蛋白质检 | 利用定性或者定量分析的方法进行蛋白质鉴定 | 检测结果 | |
最终交付 | 根据客户需求,提供蛋白冻干等服务 | 目的蛋白及实验报告 |
服务优势
项目经验丰富,成功比例大于95%。
一站式定制技术服务
大规模制备与发酵:我们拥有多种规模的发酵能力,可在短时间内交付客户克级、高纯度的目的蛋白