细胞免疫荧光是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。
安必奇生物的分子生物学,细胞生物学产品,实验条件,设备,实验人员,助力您的实验完成。
技术流程
细胞爬片:将细胞按20%-30%的汇合度接种到24孔细胞培养板中的圆形盖玻片上。
细胞固定:4%冷的多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。
细胞通透:Triton X-100 通透20分钟,PBS洗三遍。
封闭:用与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,PBS洗三遍。
一抗孵育:一抗4度湿盒内过夜,也可37度2小时,PBS洗三遍。
二抗孵育:二抗室温孵育2小时或者37度1.5小时(避光),PBS洗三遍。
DAPI染核:在二抗孵育1小时后加入终浓度为100ng/ml的DAPI继续孵育。然后可在荧光显微镜下观察或直接封片保存。
甘油封片:在载玻片上滴一小滴甘油,小心地将细胞爬片从细胞培养板中取出来,种植有细胞的一面朝下轻轻的盖在甘油上,避免产生过气泡。4度孵育过夜晾干。
服务流程
• 根据客户所需要目的蛋白和提供的一抗,进行预实验验证一抗的效价。
• 目的蛋白和一抗二抗孵育显色。
• 提供实验报告:包括详细的实验方法及实验结果的相关图表。
交付结果
完整的实验报告,包括实验过程、所用仪器试剂和相关分析数据
询价及订购
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