由于同源重组修复与非同源末端连接相比发生频率较低,所以科学家开发了用于单碱基编辑的系统。该单碱基编辑系统不需要诱导DNA双链断裂,也不需要加入DNA修复模板即可实现位点单碱基的改变。该技术已成功地应用于多种单子叶植物和双子叶植物,如小麦、水稻、玉米、拟南芥和番茄等。
CRISPR单碱基编辑系统包含一个失活的Cas9(dead Cas9,dCas9)或仅可造成缺口的Cas9(Cas9 nickase,nCas9)和胞苷脱氨酶或腺嘌呤脱氨酶。胞嘧啶碱基编辑系统(cytidine base editors,CBEs)可将胞嘧啶(C)转变为尿嘧啶(U),尿嘧啶随后通过DNA复制或修复的方式转变为胸腺嘧啶(T)。类似地,腺嘌呤碱基编辑系统(adenine base editors,ABEs)可将腺嘌呤(A)转变为肌苷(I),然后转变为鸟嘌呤(G),从而实现A到G的转换。
图1. 具代表性的胞嘧啶(左)和腺嘌呤(右)单碱基编辑系统(Eid et al., 2018)。
公司优势:
技术熟练,服务周期短、质量高。
有许多系统可选:
可提供多种Cas9变体,如SpCas9、SaCas9、SpVQR-Cas9、SpEQR-Cas9、SpVRER-Cas9和SaKKH-Cas9,它们具有不同的PAM识别位点。
可提供编辑窗口窄且脱靶效率低的单碱基编辑系统。
可提供TAM和CRISPR-X系统,它们可以分别将C转变成A、G或T,和将G转换为A、C或T。
可以提供进行mRNA编辑的CRISPR/Cas13系统。
北京安必奇生物可以为客户提供单碱基编辑服务,包括载体构建和转化,以及随后的基因功能分析。我们与国内外公司具有合作,可以在基因编辑和转基因技术方面提供解决方案。如有任何相关问题,可随时联系我们的工作人员,我们尽快为您解答和服务!
实验流程:
参考文献
Eid, A.; et al. (2018).CRISPR base editors: genome editing without double-stranded breaks. Biochemical Journal, 475 (11), 1955-1964.