大鼠单克隆抗体简介:
大鼠单克隆抗体系使用大鼠进行免疫,并将其激活的B细胞与瘤细胞融合进而筛选阳性单克隆来制备的高特异性抗体,具有如下优点:
· 单克隆抗体的一般优点
· 检测小鼠来源的抗原一般不会产生背景交叉反应
· 解决针对小鼠蛋白的抗体难以在小鼠自身中产生的问题
安必奇的优势:
虽然大鼠单克隆抗体有上述适用情况和优势,但由于之前大鼠实验体系中没有成熟的肿瘤细胞系用于融合,因而使得制备大鼠单克隆抗体的难度和成本都增加。为了解决这个问题,安必奇的技术人员优化了大鼠的骨髓瘤细胞。
我们的大鼠单克隆抗体:
· pM级的亲和性和异性
· 对多种抗原均有效果
· 可以识别区分转录后修饰(PTM)
· 可同时识别人类蛋白及其小鼠同源蛋白(要求序列同源性高)
· 适用于甲醛固定的免疫组化
· 可制备具有生物活性的抗体
服务具体内容:
可使用小分子、多肽、修饰多肽、蛋白、融合蛋白、修饰蛋白等作为抗原进行单克隆抗体制备。同时,我们也提供抗原制备服务,包括DNA合成、质粒构建、蛋白表达、蛋白纯化、蛋白修饰、多肽合成、多肽修饰、多肽与载体蛋白交联、小分子结构分析及与载体蛋白交联等。如客户需要,我们还提供抗体提纯及抗体鉴定服务。
(所涉及转录后修饰一般包括:磷酸化、甲基化、乙酰化、泛素化修饰等)
具体制备大鼠单克隆抗体流程如下:
步骤 | 服务内容 | 周期 |
1.免疫动物 | 1. 免疫大鼠3-5只; 2. ELISA检测血清滴度。 | 8-11周 |
2.杂交瘤制备 | 1. 细胞融合制备杂交瘤; 2. ELISA筛选细胞株。 | 3周 |
3.项目中样品反馈(可选) | 1. 将ELISA阳性细胞上清寄给客户检测; 2. 客户检测并选择所需细胞株。 说明:由于未亚克隆的细胞进行培养易丢失阳性细胞株,故要求客户在收到上清后的10日内返回挑选结果。 | 2-4周 |
4.亚克隆 | 1. 将客户选择的所有阳性细胞株亚克隆; 2. 将亚克隆成功的阳性细胞株扩大培养,每个细胞株冻存两管备用; 3. 抗体亚型鉴定; 若获得多于3株细胞,且客户要求交付额外的细胞,则在套餐外另计费。 客户亦可选择不进行亚克隆,而直接扩大培养。 | 2-6周 |
5.抗体纯化(可选) | 从细胞上清液用蛋白A或蛋白G纯化IgG抗体; 或可选择在裸鼠或SCID小鼠中进行腹水培养并纯化。 | 2-4周 |
6.抗体配对(可选) | 1.若干株阳性单抗两两组合,进行夹心ELISA实验; 2.根据夹心ELISA实验结果挑选配对抗体; 3.出具相关的检测报告提供给客户。 | 2-4周 |
7.功能验证(可选) | 可以根据客户对抗体的要求进行ELISA、WB等实验的检验验证,确定制备获得的抗体是否可用于该实验。 | 1-3周 |
8.保证型服务(可选) | 重复前述实验(杂交瘤制备,抗体纯化和检测实验;如有必要则重复动物免疫实验)直至获得符合要求的抗血清或纯化抗体。 | NA |
动物在SPF条件下饲养
使用进口耗材和试剂(Corning,Gibco,HyClone或具有同等质量的品牌)
您将收获:
实验报告和鉴定/验证报告
阳性杂交瘤上清(用于客户鉴定和挑选)
3株阳性细胞株亚克隆(或选择直接阳性克隆扩大培养)
异性与亲和性的大鼠源单克隆抗体