原位杂交技术(In situ hybridization,ISH)是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列,将有放射性或非放射性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对,结合成核酸杂交分子,经检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。
荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization, FISH)则是在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记的原位杂交方法,是利用荧光标记的DNA探针来检测在细胞、组织和肿瘤的特定DNA序列的分子诊断技术。首先将样本DNA变性,加入特定的荧光标记的探针与变性的样本混合进行杂交,退火得到双链DNA。探针信号能够被荧光显微镜捕获,从而定性、定量地检测目标DNA。与其它用于研究染色体的技术不同,FISH操作灵活,不需要在正在分裂的细胞进行检测,因而能够用来检测基因或染色体是否异常,通常用于遗传咨询,医学和品种鉴定、DNA特定功能研究。利用FISH方法还可检测非整倍体,微缺失综合征以及基因重排等,这些指标对遗传性疾病,如白血病,淋巴瘤,实体瘤,自闭症等发育综合征有重要的临床意义。
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• 样品制备:
我们为多个FISH应用建立了实验方案以增强灵敏度和信号,包括:
• 细胞染色体FISH(间期,中期和培养的细胞);
• 组织染色体FISH(福尔马林固定的、石蜡包埋组织切片或细胞玻片);
• RNA-FISH(细胞内RNA定位,RNA加工,定量)。
• 探头设计、标记及纯化:利用技术,我们设计了具有灵敏度和特异性探针,并提供多种标记以供选择。
• 杂交:在定制优化杂交条件方面,我们具有经验。
• 报告:可发表的形式的报告及高清照片。
• 分析:在做每一个项目之前,我们的技术人员将与您讨论实验设计的细节,帮助您尽快得到满意的结果。
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