外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上，使宿主细胞可长期表达目的蛋白，称稳定细胞系。稳定细胞系在生物学研究中扮演着非常重要的角色，包括基因功能研究、重组抗体、药物开发等。然而构建一个有效的细胞系是一件复杂而费时的工作。安必奇作为专业的生物医药研发服务机构，拥有一系列稳定细胞系构建前沿技术及丰富的哺乳动物细胞培养经验，可以为您提供各种细胞系定制服务。我们已经为世界各地的客户构建了各种各样的定制细胞系，包括基因过表达（Reporter细胞系、GPCR细胞系、离子通道细胞系等）、Knockdown、Knockout细胞系等。我们深知科研工作的时间宝贵，因此致力于细胞系定制服务。我们构建的细胞系可直接应用于各种下游的生物学研究，包括基因调控、蛋白质工程、重组抗体制备、药物研发等。
同时，我们提供医学疾病分子机制整体课题外包服务，基于细胞/动物模型，发现新致病基因和已知致病基因的突变型，从而研究疾病的遗传分子机制，推动转化医学研究和成果转化。
技术流程 
载体构建- 目的基因过表达载体的构建。
病毒包装- 表达载体、辅助质粒共转染293FT细胞，收集病毒上清，纯化和浓缩病毒颗粒。若选择转染，则跳过此步。
转染、转导- 电转染或转染试剂（脂质体等）进行细胞转染，或病毒转导。
筛选- 根据表达载体的筛选基因选择药物进行筛选，如嘌呤霉素、G418等。
扩大培养- 将筛选出的单克隆细胞进行扩大培养。
鉴定- PCR、Q-PCR、western等从DNA、mRNA、蛋白水平进行检测。
| 服务步骤 | 服务周期 | 交付结果 |
| 目的基因合成 | 1周 | 测序报告 |
| 目的基因亚克隆 | 3天 | 冻干粉质粒、含重组质粒的甘油菌一管、测序报告 |
| 病毒包装 | 1周 | 病毒储存液(>10^8 PFU)、重组后的病毒载体质粒 |
| 阳性克隆筛选 | 2周 | 用于筛选的药物浓度 |
| 阳性克隆鉴定 | 3天 | 阳性细胞株、测序报告、Q-PCR、western检测结果 |
服务内容
我们的优势
多样的细胞种类- 在H1299、2F-2B、4T1、786-O、9607、THP-1、MCF7/ADR、A549、 V79、CHO、HepG2 等多个种属细胞中成功构建过表达、Knockdown和Knockout细胞系。
各种表达载体- 通过2A、IRES、多启动子、融合表达等手段，在一个质粒里实现同时表达两个或者两个以上基因。同时，还可以选择多种启动子、报告基因和亲和标签。
服务- 我们提供从稳定细胞系构建至重组蛋白生产的服务。
省时省钱- 在先进的实验设备和完善的技术支持下，让您在短时间内，用少量的钱获得服务。
