全长转录组测序(Iso-Seq)是基于PacBio单分子实时测序技术,凭借超长读长的优势(平均读长10-15Kb),可以轻松跨越从5'末端到3'-Poly A尾的完整转录本,无需打断RNA分子,从而获得高质量全长转录本序列。
通过全长转录组测序能够更精准地得到mRNA全长序列及完整结构信息,可以对新基因及其Iso-form进行更全面的研究,克服了转录本二代测序拼接短、信息不完整的难题;实现对可变剪接、同源异构体、同源基因、等位基因、融合基因等精确分析。主要应用领域有比较转录组学、发育转录组学、环境转录组学、辅助基因组注释、肿瘤疾病研究等。
我们的优势
超长读长,全面覆盖无需拼接,获取mRNA全长序列
高质量的数据保障
精准鉴定更多新基因和新转录本
丰富的项目经验
全面的分析内容
周期短,有竞争力的价格优势
可定制的项目设计
技术流程
数据分析
全长无参转录组分析
标准分析:
1. 原始数据处理
2. 全长转录本分析:插入片段质控、转录本分类、聚类与矫正
3. 转录本注释:Gene Ontology分析、KEGG pathway分析、KOG或COG分析、Swissport分析
4. 基因结构分析:可变剪切分析、SSR分析、CDS分析、LncRNA分析、基因家族分析
高级分析:
1. 参考序列比对
2. 表达水平分析
3. 差异表达分析
4. 差异表达转录本KEGG富集分析
5. 差异表达热图分析
6. 差异表达转录本GO富集分析
全长有参转录组分析
标准分析:
1. 原始数据处理
2. 全长转录本分析:插入片段质控、转录本分类、聚类与矫正、与参考基因组比对
3. 转录本注释:Gene Ontology分析、KEGG pathway分析、KOG或COG分析、Swissport分析
4. 基因结构分析:转录本结构注释、可变剪切分析、SSR分析、新转录本预测、CDS分析、LncRNA分析、融合基因鉴定
高级分析:
1. 参考序列比对
2. 表达水平分析
3. 差异表达分析
4. 差异表达转录本KEGG富集分析
5. 差异表达热图分析
6. 差异表达转录本GO富集分析
7. 基因表达趋势分析
8. 权重共表达网络分析
9. 样本间差异融合基因比较
样本要求
样本类型 | 总量 | 浓度 | RIN值 |
Total RNA | ≥5 mg | ≥300 ng/μl | ≥ 8 |
技术参数
测序平台 | 文库类型 | 数据量 | 运转周期 |
PacBio SMRT | ~10 Kb | 10 G/样本 | 视具体项目情况而定 |