基因工程技术,特别是CRISPR/Cas9基因编辑系统,提高了科学家进行基因组编辑的能力。然而,人们经常担心转基因食品的安全性。因此,科学家开发了DNA-free的基因组编辑方法。目前,DNA-free基因编辑方法不仅得到了学术界广泛的关注,还得到了工业界的青睐。
北京安必奇生物可提供多种DNA-free的植物基因组编辑方法,可帮助实现更安全的植物转基因产品。这些技术包括瞬时表达CRISPR/Cas9质粒DNA(transiently expressed CRISPR/Cas9 plasmids DNA,TECCDNA) (图1)、体外转录CRISPR/Cas9 (in vitro transcripts,IVTs)以及由纯化好的Cas9蛋白和sgRNAs组成的预组装核糖核酸复合物(ribonucleoprotein, RNPs)(图2)。这些技术可以避免外源DNA与基因组的整合,并可以减少脱靶效应。此外,与传统的技术相比,这些技术可避免用杂交或回交来分离CRISPR/Cas9嵌合体,因此更便宜、实验周期更短。
图 1. 瞬时CRISPR/Cas9 DNA 编辑技术(Zhang et al., 2016)。
图 2. DNA-free植物CRISPR/Cas9 RNAs体外转录和RNP技术(Yin et al., 2017)。
我们可提供方法将TECCDNA、IVTs和RNPs 转入植物细胞,主要有聚乙二醇(PEG)、阳离子脂质和/或电穿孔介导的原生质体转化和基因枪介导的未成熟胚转化(图1和2)。该技术运用到拟南芥、烟草、生菜、水稻和小麦等物种。我们拥有的专家,可以为客户提供从TECCDNA、IVTs和RNPs的制备到突变筛选的服务。如需进一步的信息,请随时与我们的工作人员联系。
参考文献:
1. Zhang Y.; et al. Efficient and transgene-free genome editing in wheat through transient expression of CRISPR/Cas9 DNA or RNA. Nature Comm. 2016, 7: 12617.
2. Yin K.; et al. Progress and prospects in plant genome editing. Nature Plants. 2017, 3: 17107.