小鼠单克隆抗体简介:
单克隆抗体是由激活的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成的单克隆杂交瘤细胞产生的。小鼠单克隆抗体是常见的单克隆抗体。同时小鼠也是生物学和医学领域中常见的模式动物之一。
· 高度特异性
· 高度均一性
· 可快速、大量、连续生产
· 应用领域广泛,涵盖检测治疗等多个领域
· 制备方案和工具成熟
· 应用前景良好
安必奇的优势:
· 节省宝贵时间
· 新型佐剂MagicTM免疫佐剂,仅需21天即可引起免疫效应
· 阳性杂交瘤细胞的筛选平台----Omni-HybridomaTM platform
· MagicTM hybridoma growth factor提高细胞融合成功率存活率,使抗体稳定表达
我们的小鼠单克隆抗体:
· pM级的亲和性和高特异性
· 对多种抗原均有效果
· 可以识别区分转录后修饰(PTM)
· 适用于甲醛固定的免疫组化
· 可大量制备具有生物活性的抗体
服务具体内容:
可使用小分子、多肽、修饰多肽、蛋白、融合蛋白、修饰蛋白等作为抗原进行单克隆抗体制备。同时,我们也提供抗原制备服务,包括DNA合成、质粒构建、蛋白表达、蛋白纯化、蛋白修饰、多肽合成、多肽修饰、多肽与载体蛋白交联、小分子结构分析及与载体蛋白交联等。如客户需要,我们还提供抗体提纯及抗体鉴定服务。
(所涉及转录后修饰一般包括:磷酸化、甲基化、乙酰化、泛素化修饰等)
小鼠单克隆抗体制备流程:
步骤 | 服务内容 | 周期 |
1. 动物免疫 | 1. 免疫5只小鼠,进行2-3次免疫; 2. 采集5只小鼠血清,分别做ELISA检测; 3. 提供鉴定报告。 | 4-6周 |
2.杂交瘤制备 | 效价合格后,经客户同意后,进行融合实验: 1. 选取血清效价高的小鼠的取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。 2.有限稀释融合细胞,96孔板克隆化; 3. HAT筛选杂交瘤细胞; 4. 免疫原检测,检测出抗原阳性1-10个阳性细胞,扩大培养至48孔板; 5. 挑取阳性克隆扩增,微量-80度冻存细胞【冻存细胞可保存1年以上】; 6. 提供客户1ml上清/阳性克隆,供客户检测,检测结果20天内反馈。 客户根据自己的ELISA检测、功能检测结果,挑选阳性克隆;丢弃其余克隆。如果客户需要保存其余克隆,需要提前沟通,另行约定费用和保存方式。 | 4-6周 |
3.亚克隆 | 根据客户的要求,选取阳性克隆进行亚克隆: 1. 每个克隆做96孔板有限稀释培养,ELISA筛选阳性亚克隆; 2. 阳性克隆扩增,少量-80度冻存细胞; 3. 提供1ml杂交瘤细胞上清,供客户进行检测;检测结果请在20天内反馈。 套餐中包括总共不超过3个阳性亚克隆细胞,默认根据结果好的3个阳性亚克隆,放大至T-25 Flask培养,ELISA再次确认后进行细胞冻存,每个亚克隆冻存3管细胞。 | 1-3周 |
4. 腹水制备(可选) | 1. 客户选取的杂交瘤细胞制备腹水,免疫2只小鼠,Protein A纯化腹水,ELISA检测效价; 2. 提供纯化后杂交瘤细胞,<5mg/clone; 3. 提供实验报告和剩余腹水抗体; 注:亦可选择细胞上清纯化。 | 1-3周 |
5. 套餐外阳性杂交瘤细胞的选取(可选) | 套餐(3个亚克隆)之外的其它备选细胞, 若客户需要亚克隆,每额外增加一个亚克隆, 需要额外支付的费用。 | N/A |
6.抗体配对(可选) | 1.若干株阳性单抗两两组合,进行夹心ELISA实验; 2.根据夹心ELISA实验结果挑选配对抗体; 3.出具相关的检测报告提供给客户。 | 2-4周 |
7.功能验证(可选) | 可以根据客户对抗体的要求进行ELISA、WB等实验的检验验证,确定制备获得的抗体是否可用于该实验。 | 1-3周 |
8.保证型服务(可选) | 重复前述实验(杂交瘤制备,抗体纯化和检测实验。如有必要则重复动物免疫实验)直至获得符合要求的抗血清或纯化抗体。 | N/A |
动物在SPF条件下饲养
使用耗材和试剂(Corning,Gibco,HyClone或具有同等质量的品牌)
您将收获:
实验报告和鉴定/验证报告
阳性杂交瘤上清(用于客户鉴定和挑选)
3株阳性细胞株亚克隆(或选择直接阳性克隆扩大培养)
纯化的高特异性与高亲和性的小鼠源单克隆抗体