安必奇生物推出基于Red同源重组和CRISPR/Cas9的乳酸菌基因组编辑服务。成熟的乳酸菌(Lactic acid)编辑体系,助您成功实现基因敲除、基因插入和点突变。
基于Red同源重组法的乳酸菌基因组改造
乳酸菌基因敲除的传统方法是利用自身的Red系统对外源进入的DNA进行同源重组,从而实现目标基因的等位替换。通过设计靶基因的同源融合片段,将其克隆至自杀载体中,自杀载体通过接合输入到靶细菌。通过抗生素筛选细菌基因组靶位点整合有自杀载体的插入突变株。在第二轮反向选择压力下,只有乳酸菌基因组发生第二次同源重组并丢失自杀质粒才可以存活。
基于CRISPR/Cas9平台的乳酸菌基因组改造
CRISPR/Cas9系统是细菌和古细菌特有的一种天然防御系统,用于抵抗病毒或外源性质粒的侵害。安必奇生物科技推出CRISPR方法进行乳酸菌基因组改造服务(包括基因敲除、定点突变、定点插入外源序列等)。相比于传统的基因敲除方法,该方法速度快,无痕;非常便于后续的实验研究。
研究内容
乳酸菌基因敲除(Lactic acid bacteria gene knockout)
乳酸菌基因敲入(Lactic acid bacteria gene knockin)
乳酸菌基因点突变(Lactic acid bacteria gene point mutation)
服务优势
无痕编辑
多基因编辑:能同时敲除多达3个基因
便于筛选:不要求靶细菌具有抗生素抗性
周期快:3周交付
定制服务:模式菌株或者宿主菌株
定制服务:开发特殊物种的基因组编辑系统
客户提供信息
乳酸菌宿主菌株信息
靶基因的ID或靶序列
下游应用
抗生素及重要工业用酶
发现新的基因功能
优化代谢通路,提升代谢产物产量,实现工业化生产
参考文献:
Selle K, Barrangou R. Harnessing CRISPR–Cas systems for bacterial genome editing[J]. Trends in microbiology, 2015, 23(4): 225-232.
Zerbini, F., Zanella, I., Fraccascia, D., König, E., Irene, C., & Frattini, L. F., et al. (2017). Large scale validation of an efficient CRISPR/Cas-based multi gene editing protocol in Escherichia coli. Microbial Cell Factories, 16(1), 68.