细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖,通过分裂,可以将复制的遗传物质,平均地分配到两个子细胞中去,是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。单细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老和死亡的细胞;同时,多细胞生物可以由一个受精卵,经过细胞的分裂和分化,最终发育成一个新的多细胞个体。
细胞增殖检测的准确方法之一,就是直接测定DNA的合成,同时也是测定物质毒性、评估药物安全、细胞健康的基本方法。通过检测细胞增殖活性,可以指示肿瘤细胞增殖活性、目的基因瞬转/稳转细胞系的细胞增殖活性,在小分子化合物/多肽等药物筛选及功能安全性研究、中药/中间体等药物筛选及功能安全性研究、目的基因过表达的基因功能研究、目的基因RNAi干扰的基因功能研究中发挥重要作用。
北京安必奇生物能够提供细胞增殖及活性检测服务。目前常用的细胞增殖检测方法包括胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法、MTT检测法、CFSE检测法、Brdu检测法、EdU检测法以及CCK8检测法。安必奇生物主要采用CCK-8法检测细胞增殖。
实验流程
CCK-8(Cell Counting kit-8)试剂中含有2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐(WST–8),其在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下,被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物(Formazan)。因生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比,因此可采用酶标仪在450nm波长处测定其光吸收值,从而间接反映活细胞数量。
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