蛋白质非标记定量技术(label-free)是通过液质联用技术对蛋白质酶解肽段进行质谱分析,无需使用昂贵的稳定同位素标签做内部标准,只需分析大规模鉴定蛋白质时所产生的质谱数据,比较不同样品中相应肽段的信号强度,从而对肽段对应的蛋白质进行相对定量。
技术流程
服务优势
无需同位素标签做内部标准,实验耗费低。
对样本的操作少,从而使其接近原始状态。
不受样品条件的限制,克服了标记定量技术在对多个样本进行定量方面的缺陷。
对实验操作稳定性、重复性要求高,要求至少做三次技术重复或生物重复。
同位素标记和非标记定量的比较
同位素标记 | 非标记定量 |
样本标记同位素 | 样本非标记 |
在大样本过程中,难于追踪蛋白丰度 | 易跟踪蛋白丰度 |
低丰度蛋白识别有限 | 能够鉴别低丰度蛋白 |
需提前进行二级质谱蛋白鉴定 | 可以鉴定差异后再进行二级质谱蛋白鉴定 |
实验重复性高 | 实验重复性低 |
技术平台
Triple TOF 5600, Q-Exactive, Orbitrap Fusion™ Tribrid™
应用领域:
机理和调控机制研究
动态过程中机制研究
疾病标志物的筛选
用药及预后标志物筛选